1 、左手斜持瓊脂平板，皿蓋留在桌上，于火焰近處將菌涂于瓊脂平板上端，來回劃線，涂成薄膜（約占平板總表面積的 1/10 ），劃線時接種環(huán)與平板表面成 30~40 º角，輕輕接觸，以腕力在平板表面行輕快地滑移動作，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面。

2 、右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅，待涼后，挑取大腸桿菌（或葡萄球菌）培養(yǎng)物少許。

3 、燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌，待冷（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從薄膜處取菌作連續(xù)平行劃線，約占平板表面 1/5 左右，再次燒灼接種環(huán)，以同樣方法作第四次，第五次劃線，將平板表面劃完。

4 、劃線完畢，蓋上平皿蓋，底面向上，用標簽或臘筆注明菌名檢驗號碼，接種者信息等，置 37 ℃孵育培養(yǎng) 24 小時后觀察結(jié)果。

  這是一種相對簡單的劃線方法，我們可以在平時的實踐當中去應(yīng)用一下，可以得到很好的結(jié)果。

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